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解析PCR試劑盒是什么

來源: 上海邦景實業有限公司 >> 進入該公司展臺 2021/11/15 15:28:11 已瀏覽:
導讀:解析PCR試劑盒是什么


核酸檢測試劑盒叫熒光PCR探針法。

試劑盒里分好幾部分,*重要的是PCR反應體系:DNA聚合酶,鎂離子,引物(新冠測2個基因和1個內標需要3對引物),探針(也要3對探針,發出三種波長的熒光),逆轉錄酶,dNTP(ATUCG會用部分U代替T),還有用于抗干擾的UDG酶(正常的DNA只有ATCG,PCR擴增出來的DNA會有AT(會用部分U代替T)CG,這樣擴增出來的DNA鏈中有U,UDG酶能切斷含U的DNA鏈,以擴增DNA在空氣中形成的氣溶膠,不會影響其他樣本)、RNA酶抑制劑(空氣中液體里全都是RNA酶,會降解病毒的RNA)、Taq酶的抗體(Hot start,常溫下能抑制Taq酶的活性,PCR擴增時高溫讓其失活,Taq酶就在高溫時恢復活性開始擴增了)。

還有陰陽性對照,陰性為水,陽性通常的合成的DNA,新冠的N基因和ORFlab基因和內標基因。

內標的作用通常為人的基因,有的樣本結果內參基因有擴增曲線,否則無效。

反正流程:核酸提取,逆轉錄,cDNA高溫95℃變性(同時Taq酶的抗體失活),剩下變性到退火延伸很多次循環,*就得到結果了。熒光PCR儀的作用在擴增的同時能夠監測探針的發光,得知擴增后DNA的量。




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